ICS 65.020.20
B16
DB36 江西省地方标准
DB36/T 1031—2018
水稻二化螟抗药性检测技术规程（饲料浸药法）
Technological rules for monitoring insecticide resistance in striped stem borer (Chilo suppressalis Walker) using artificial diet dipping bioassay method
2018-03-19发布
2018-09-20实施
江西省质量技术监督局 发布

前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由江西省农业厅提出并归口。
本标准起草单位：江西省农业科学院植物保护研究所、江西省农业生态与资源保护站、江西省余江县植保植检站、江西省植保植检局。
本标准主要起草人：黄水金、孙杨、秦文婧、熊焕华、刘晖、王惠明、徐样庚、王希、史建苗、盛琦、饶喜。

1 范围
本标准规定了采用饲料浸药法检测二化螟（Chilo suppressalis Walker）抗药性的方法，包括术语和定义、试剂与材料、主要仪器设备、试验步骤、数据统计与分析、抗性水平评估及检测报告编写。
本标准适用于杀虫剂对二化螟室内毒力测定和抗药性评估。

2 术语和定义
2.1 抗药性（Insecticide resistance）
昆虫忍耐可杀死正常种群大部分个体剂量的能力，并在种群中逐渐发展形成的能力。
2.2 敏感基线（Susceptibility baseline）
在某种农药使用之前，昆虫敏感品系的毒力基线LC50。
2.3 饲料浸药法（Artificial diet dipping bioassay method）
二化螟幼虫接触并取食浸渍农药的人工饲料而中毒死亡的毒力测定方法。

3 试剂与材料
3.1 生物试材
二化螟4龄初期幼虫。

3.2 试验试剂与药剂
试剂为分析纯，药剂为农药原药。

4 主要仪器设备
电子天平（感量0.0001g）、手持搅拌机、料理机、切片器、毛笔、眼科镊、移液器、平底玻璃管（直径3cm，高5cm）、1000ml烧杯（直径13cm，高15cm）、恒温培养箱或人工气候箱、高压湿热灭菌锅、微波炉。

5 试验步骤
5.1 卵块采集、管理及人工饲料配制
5.1.1 卵块采集
在成虫盛发期，从田间诱蛾带回室内产卵，或直接从水稻田采集二化螟卵块。

5.1.2 卵块孵化及幼虫管理
在直径9cm培养皿中放入滤纸3～4片，加入适量灭菌蒸馏水保湿，将卵块置于其中培养至黑头期。将黑头卵块放入装有饲料的玻璃管中，每管1～2个卵块，塞棉花塞。幼虫孵出并转移至饲料后移除卵壳残余，将幼虫置于温度28±1℃、相对湿度60%～70%、光周期16h:8h条件下培养至4龄初期。

5.1.3 药剂配制
农药原药用丙酮、二甲基甲酰胺等有机溶剂溶解，加入10% Triton-X100或吐温80制备制剂，并用蒸馏水稀释。根据预试验结果设置5～7个质量浓度梯度，每个浓度药液不少于200ml。

5.1.4 人工饲料配制方法
按配方称取各组分备用。将新鲜葵白切碎，加水后用料理机匀浆，与大豆粉、酵母粉、干酪素、蔗糖混合并灭菌（125℃，30min）。琼脂加水加热溶解后加入饲料中搅拌均匀，冷却至约60℃。加入抗坏血酸钠、尼泊金酯、山梨酸、胆固醇、氯化胆碱、威氏盐、复合维生素等溶液，并加入40%甲醛充分混匀。最终倒入无菌容器中冷却凝固，4℃保存备用。