ICS65.105
B50
备案号：
DB
天津市地方标准
DB12/T179-2003
嗜水气单胞菌出血性败血症检疫规程
The Quarantine Instruction for Hemorrhagic Septicemia from Aeromonas hydrophila
2003-11-25发布
天津市技术监督局发布
2004-01-01实施

本标准的附录A、附录B为资料性附录。本标准由天津市水产局提出。本标准由天津市水产局归口。本标准起草单位：天津市水产研究所。本标准主要起草人：李秀梅、赵燕超、乔之怡。本标准于2003年11月首次发布。

1 范围
本标准规定了嗜水气单胞菌出血性败血症的检疫规程。本标准适用于天津地区鱼类检疫，也适用于我国国内地区间鱼类的检疫、诊断。

2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有修改单（不包括勘误内容）或修订版均不适用于本标准，但鼓励使用最新版本。
GB4789.12 食品卫生检验方法 微生物学部分
GB/T6682-1992 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T18088-2000 出入境动物检疫采样

3 准备
3.1 设备和仪器见附录A。
3.2 培养基和试剂的配制方法见附录B。

4 采样
4.1 采样数量：无症状鱼类按GB/T18088-2000执行；有症状鱼类随机挑取不少于10尾发病或濒死个体。
4.2 采集部位：怀疑有病原存在的组织或器官。

5 实验室用水要求
按照GB/T6682-1992规定执行。

6 临床症状
6.1 外部症状：鱼体发黑，鳍基部充血，两侧点状或块状出血，吻端、上下颌、口腔、鳃盖、眼部严重充血。
6.2 剖检：腹腔积液或血水混合液，肝胰脏、脾脏、肾脏肿大，脾脏紫黑色，肾脏松弛或积水，胆囊肿大异常；肠壁及肠系膜充血，肠内无食物或积液，严重贫血。

7 实验室检验
7.1 取样：无菌操作取肾组织接种于TCBS培养基进行划线培养。

7.2 培养：37℃培养24h，挑选菌落转接普通琼脂培养基纯化。TCBS上为黄色菌落，普通琼脂上为圆形、光滑、灰白或淡粉色菌落。

7.3 检验项目：
7.3.1 菌体运动性观察：暗视野显微镜观察是否运动。
7.3.2 革兰氏染色：观察染色特性与形态。
7.3.3 氧化酶试验：紫红色为阳性。
7.3.4 氧化-发酵试验（O-F）：判断代谢类型。
7.3.5 生化鉴定：进行赖氨酸、精氨酸、鸟氨酸、葡萄糖产气、蔗糖、甘露醇、水杨苷、6%氯化钠、枸橼酸盐等九项生化反应鉴定。