ICS 11.220
B41
DB34

安徽省地方标准
DB34/T 2850—2017

番鸭细小病毒PCR检测方法
Detection Method of Muscovy Duck Parvovirus by PCR

2017-03-30 发布
2017-04-30 实施

安徽省质量技术监督局 发布

前言
本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。

本标准由安徽省农业科学院畜牧兽医研究所提出。

本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：安徽省农业科学院畜牧兽医研究所、安庆永强农业科技股份有限公司。

本标准起草人：戴银、潘孝成、胡晓苗、张丹俊、黄永强、赵瑞宏、周学利、侯宏艳、沈学怀、胡业和、夏生林、吴娟、王骏俊、朱传民。

1 范围
本标准规定了番鸭细小病毒的PCR检测方法。

本标准适用于番鸭肝脏、脾脏、胰腺病变组织及番鸭胚尿囊液中番鸭细小病毒核酸的检测。

2 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。

2.1 番鸭细小病毒（Muscovy Duck Parvovirus，MDPV）
属于细小病毒科、细小病毒亚科、依赖病毒属，基因组为线性单链DNA。

3 检测方法

3.1 仪器
3.1.1 PCR仪（扩增仪）
3.1.2 台式低温高速离心机（温控范围：-4℃～25℃）
3.1.3 电泳仪（电压范围：60～120V）
3.1.4 凝胶成像系统
3.1.5 冰箱
3.1.6 微波炉
3.1.7 水浴锅（温控范围：37℃～100℃）
3.1.8 微量移液器（量程：0.5～10 μL，10～100 μL，100～1000 μL）

3.2 试剂和材料
3.2.1 见附录A中的A.1细胞裂解液
3.2.2 酚、氯仿、异戊醇、异丙醇、乙醇
3.2.3 蛋白酶K
3.2.4 灭菌双蒸水
3.2.5 Taq DNA聚合酶
3.2.6 dNTP
3.2.7 DNA分子量标准：DL2000 DNA Marker
3.2.8 溴化乙锭（EB，10 μg/μL）或核酸染料
3.2.9 磷酸盐缓冲液（PBS，0.01 mol/L，pH 7.2），见附录A中的A.2
3.2.10 50×TAE电泳缓冲液，见附录A中的A.3