ICS65.020.30 B43 中华人民共和国国家市场监督 管理总局备案号：59624-2018 DB53 云南省地方标 准 DB53/T876—2018 甘蔗白叶病病原巢式PCR检测技术规程2018-07-01发布 云南省质量技术监督局 2018-10-01实施 发布 前言 DB53/T876—2018 本标准按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。本标准由云南省农业科学院提出。本标准由云南省农业标准化技术委员会（YNTCO7)归口。本标准起草单位：云南省农业科学院甘燕研究所。本标准主要起草人：仓晓燕、黄应昆、李文凤、王晓燕、张荣跃、单红丽、罗志明、尹炯。I 1范围 甘蔗白叶病病原巢式PCR检测技术规程DB53/T876-2018 本标准规定了仪器与器材、试剂、采样及样品处理、DNA提取、巢式PCR检测、及结果判定等。本标准适用于甘蔗白叶病病原巢式PCR检测。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T28067甘煎黄叶病毒实时荧光RT-PCR检测方法。术语和定义 3 下列术语和定义适用于本文件。3.1 巢式PCR 巢式PCR是一种使用两对PCR引物扩增完整的片段，第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似第二对引物结合在第一次PCR产物内部，使得二次PCR扩增灵敏度高于一次PCR扩增的变异聚合酶链反应。 缩略语 4 下列缩略语适用于本文件。 bp：碱基对(basepair) CTAB：十六烷基三甲基溴化铵(HexadecylTrimethylAmmoniumBromide)dNTPs：脱氧核苷三磷酸混合液(DeoxyribonucleosideTriphosphatesmixture)ddH2O：双蒸水 EDTA：乙二胺四乙酸(EdetateDisodium)PCR：聚合酶链式反应(Polymerasechainreaction)Tris：三羟甲基氨基甲烷(HydroxymethylMethylAminomethane)仪器与器材、试剂 5.1仪器与器材 1