ICS11.220
B41
备案号：
DB42
湖北省地方标准
DB42/T1110—2015
牛支原体药物敏感性体外检测操作规程
Technique guideline on drug sensitivity test of Mycoplasma bovis in vitro（报批稿）
2015-10-30发布
湖北省质量技术监督局
2015-12-20实施

前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由华中农业大学提出并归口管理。本标准起草单位：华中农业大学。本标准协作起草单位：随州市弘大畜牧有限责任公司、湖北省松滋市春珍肉牛养殖场。本标准起草人：郭爱珍、贺晨飞、显金、陈颖钰、胡长敏、曹永强、周春、陈焕春。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

引言
牛支原体（Mycoplasma bovis，M.bovis）是牛的重要病原体，可引起肺炎、乳腺炎、关节炎、角膜结膜炎、耳炎及生殖道炎症等多种疾病。该病在世界范围内流行。我国于2008年首次报道肉牛牛支原体肺炎，发病率可达50%～100%，病死率达10%～50%，造成严重经济损失。
目前主要依赖抗生素治疗，但由于牛支原体无细胞壁，对部分抗菌药物不敏感，且耐药性发展较快，因此开展体外药物敏感性检测具有重要意义，可用于指导临床用药及耐药性监测。然而国内外尚缺乏统一检测标准，本标准的制定旨在为牛支原体防控提供技术依据。

1 范围
本标准规定了牛支原体体外药物敏感性检测的缩略语、原理及操作步骤，适用于湖北地区牛支原体临床分离株的药物敏感性分析、耐药性流行病学调查及临床治疗。

2 规范性引用文件
GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB18597 危险废物贮存污染控制标准
DB42/T1024 牛支原体肺炎检测技术
CLSI M100-S22 抗生素敏感性检测操作标准
中华人民共和国国务院令（2003）第380号 医疗废物管理条例

3 缩略语
Mycoplasma bovis（M.bovis）
PPLO：胸膜肺炎样微生物（Pleuropneumonia-like organism）
MIC：最低抑菌浓度（Minimum inhibitory concentration）
CCU：颜色变化单位（Color change unit）
ATCC：美国菌种保藏中心（American Type Culture Collection）
CLSI：临床和实验室标准协会（Clinical and Laboratory Standards Institute）

4 原理
在液体培养基中，牛支原体生长产酸使培养基颜色由红色变为黄色。当抗生素存在并抑制其生长时，培养基保持红色。抗生素对牛支原体的抑制强度以最低抑菌浓度（MIC）表示，采用微量肉汤稀释法测定：在96孔板中加入倍比稀释的抗菌药物，再加入等体积适当稀释的牛支原体培养液，于37℃培养。