ICS11.220
B41
DB22
吉林省地方标准
DB22/T973—2019
代替DB22/T973-2002
猪霉形体肺炎检测 ELISA法
Detection of Swine enzootic pneumonia by enzyme-linked immunosorbent assay method
2019-07-25发布
吉林省市场监督管理厅
2019-08-15实施

前言
本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015给出的规则起草。本标准代替DB22/T973-2002《猪霉形体肺炎微量全血-酶联免疫吸附试验诊断技术规程》。与DB22/T973-2002相比，主要变化包括：修改名称，增加规范性引用文件，修改原理内容，将“试剂”修改为“试剂或材料”，将“仪器和材料”修改为“仪器设备”，增加样品内容，修改操作步骤为试验步骤，修改结果判定，并增加附录A。本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。本标准起草单位：吉林省畜牧兽医科学研究院。本标准主要起草人：程荣华、邵洪泽、呼延含蓉、郭衍冰、丁世杰、李昱洁、尹德福、孙艺学。

1 范围
本标准规定了猪霉形体肺炎酶联免疫吸附试验（ELISA）的试剂或材料、仪器设备、样品、试验步骤和结果判定。本标准适用于猪霉形体肺炎的检测。

2 规范性引用文件
GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法。

3 原理
吸附于固相载体表面的抗原或抗体与样品中相应抗体或抗原结合形成抗原抗体复合物，再加入酶标记抗体（抗抗体），加入底物后发生酶催化显色反应，颜色深浅与样品中相应抗体或抗原含量呈正比，可用于定性或定量检测。

4 试剂或材料
4.1 试剂
除另有说明外，所有试验用试剂均为分析纯，试验用水应符合GB/T6682一级水要求。
4.1.1 磷酸盐缓冲液（PBS，见附录A）
4.1.2 PBST（见附录A）
4.1.3 猪肺炎霉形体可溶性抗原
4.1.4 蒸馏水
4.1.5 包被液（见附录A）
4.1.6 封闭液（见附录A）
4.1.7 猪霉形体肺炎阳性血清
4.1.8 猪霉形体肺炎阴性血清
4.1.9 辣根过氧化物酶（HRP）标记兔抗猪IgG
4.1.10 底物溶液（见附录A）或等效物
4.1.11 终止液（见附录A）

4.2 材料
4.2.1 采血针
4.2.2 滤纸