ICS 65.020.30 CCS B40 内蒙古自治区DB15地方标准 DB15/T 1238—2024（代替 DB15/T 1238-2017） 绵羊肺腺瘤病毒双抗体夹心ELISA检测技术 Detection of double antibody sandwich ELISA for jaagsiekte sheep retrovirus (JSRV) 2024-05-31发布 内蒙古自治区市场监督管理局 发布 2024-07-01实施 前言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。 本文件代替DB15/T 1238-2017《绵羊肺腺瘤病毒双抗体夹心ELISA检测技术》。与DB15/T 1238-2017相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下： a）增加“规范性引用文件”一章（见第2章）； b）增加鼻拭子样品采集和保存内容（见7.2）； c）更改包被抗体（见附录A.4，2017年版A.4）； d）TMB底物显色液和终止液改为商品化试剂，删除原有配制方法（见5.8、5.9，2017年版A.8、A.9）。 本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。 本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。 本文件起草单位：内蒙古农业大学。 本文件主要起草人：刘淑英、李慧萍、张良、陈思旭、苗佳佳、刘月。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：2017年首次发布为DB15/T 1238-2017，本次为第一次修订。 1 范围 本文件规定了绵羊肺腺瘤病毒双抗体夹心ELISA检测技术的试剂、材料与设备、样品前处理、操作方法及结果判定等内容。 本文件适用于羊外周血液和鼻拭子样品中绵羊肺腺瘤病毒的检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件仅该日期对应的版本适用；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 19489 实验室生物安全通用要求 NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 绵羊肺腺瘤病毒 jaagsiekte sheep retrovirus，JSRV 引起绵羊肺腺瘤的病原，该病毒完整囊膜蛋白具有致癌作用，位于病毒粒子最外层，是构成病毒粒子的主要结构蛋白。 3.2 衣壳蛋白 capsid，CA 病毒核心蛋白，含有约20个氨基酸残基构成的高度免疫原性结构域，序列高度保守，为病毒特异抗原决定簇。 3.3 跨膜蛋白胞质尾区 transmembrane protein cytoplasmic tail，CT 病毒囊膜蛋白中跨膜蛋白的功能区，由44个氨基酸组成，含高度保守YXXM序列，可特异识别外源性JSRV。 3.4 双抗体夹心ELISA技术 double antibody sandwich ELISA