DB22/T2921—2018
禽白血病A/B/J亚群检测 PCR法
Detection method of PCR of avian leukosis A, B and J-subgroups

ICS11.220
吉林省地方标准
发布日期：2018-11-12
实施日期：2018-12-30
归口单位：吉林省市场监督管理厅

前言
本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015给出的规则起草。本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。本标准起草单位：吉林省畜牧兽医科学研究院。
本标准主要起草人：曹利利、郭衍冰、董航、姚新华、苑淑贤、程荣华、邵洪泽。

1 范围
本标准规定了禽白血病A/B/J亚群PCR检测方法的技术要求。本标准适用于禽白血病A/B/J亚群的核酸检测。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 试剂或材料
3.1 试剂
3.1.1 病毒基因组DNA提取试剂盒。
3.1.2 阳性对照，为禽白血病病毒基因组DNA，或含有上述片段的质粒标准分子DNA。
3.1.3 阴性对照，健康鸡血液或血清DNA。
3.1.4 10×PCR缓冲液，见附录A.1。
3.1.5 10mmol/L dNTPs。
3.1.6 2U/μL Taq DNA聚合酶。
3.1.7 水为DEPC处理过的双重蒸馏水（ddH2O），符合GB/T6682的规定。
3.1.8 50×TAE电泳缓冲液，见附录A.2。
3.1.9 10mg/mL 溴化乙锭（EtBr）溶液，见附录A.3或其他同类型可替代物。
3.1.10 1.0% 琼脂糖凝胶，见附录A.4。
3.1.11 上样缓冲液，见附录A.5。
3.1.12 标准分子量DNA 2000 Marker。
3.2 材料
3.2.1 10、200和1000 μL吸头。
3.2.2 1.5mL离心管。
3.2.3 无菌棉拭子。
3.2.4 0.2mL薄壁PCR管。
3.3 引物
引物序列、浓度及扩增长度见表1。