ICS 65.120 B46 DB34/T 3190-2018 安徽省地方标准 动物尿液中克伦特罗等8种β-兴奋剂的残留测定 胶体金免疫层析法 Detection of 8 β-agonists such as Clenbuterol residues in animal urine Colloidal gold immunochromatographic method 2018-08-08发布 2018-09-08实施 安徽省质量技术监督局发布 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由安徽省兽药饲料监察所提出，由安徽省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所、宁国市金东坊农业发展有限公司、宁国市金鼎家庭农场、浙江迪恩生物科技股份有限公司、铜陵市义安区动物卫生监督所、安徽省农业科学院畜牧兽医研究所、安徽省水产技术推广总站、阜阳市动物卫生监督所。 本标准主要起草人：吴吴、许世富、李东风、孙德祥、潘孝成、张利亚、方芳、徐月清、郭恒心、龙中原、胡群芳、郑举、吴兵、何为俊、郑新勇、钱昌银、程扬、吴海芬、宋亚伟、王群、汪百才、石翠芳。 1 范围 本标准规定了动物尿液中克伦特罗、沙丁胺醇、西布特罗、马布特罗、溴布特罗、妥布特罗、特布他林、盐酸氯丙那林8种β-兴奋剂的胶体金免疫层析检测方法。 本标准适用于动物尿液中上述8种β-兴奋剂的检测。 本标准检测限为：克伦特罗、沙丁胺醇、西布特罗、马布特罗、溴布特罗、妥布特罗、特布他林均为3 μg/L；盐酸氯丙那林为8 μg/L。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期版本适用；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 本试验采用胶体金竞争抑制法。将氯金酸用柠檬酸钠还原法制成一定直径的金溶胶颗粒并标记抗体，硝酸纤维素膜作为载体，利用微孔膜毛细作用进行免疫层析反应。 样本滴加在检测条样品垫后，液体向吸水垫方向移动，在流动过程中发生抗原抗体反应并通过胶体金显色。 样本中β-兴奋剂在流动过程中与胶体金标记抗体结合，抑制其与检测线上的人工抗原结合，使检测线不显色，则结果为阳性；反之检测线显紫红色，结果为阴性。 4 试剂和材料 除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水符合GB/T 6682规定的二级水。 注：不同检测卡制造商产品组成及操作存在细微差别，应按说明书规范操作。 4.1 β-兴奋剂胶体金检测卡（八合一）组成 4.1.1 β-兴奋剂类（八合一）多克隆抗体。 4.1.2 胶体金：采用氯金酸还原法制备，为带负电紫红色疏水胶体金溶液，金颗粒大小30 nm～60 nm。 4.1.3 硝酸纤维素膜：表面应平整光滑，无划痕、凹印、小孔、水迹、橘皮状缺陷及灰尘油污等。膜宽（25.4±0.5）mm，长度（100±2）mm，厚度（185±19）μm，毛细流速（180±45）s/40mm。