SN/T 4108—2015 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 除草剂啶磺草胺水分散粒剂 有效成分含量的检验方法 高效液相色谱法 Determination of active ingredient content in pyroxsulam water-dispersible granule - High-performance liquid chromatography 2015-02-09 发布 2015-09-01 实施 前言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局。本标准主要起草人：顾中怡、孙敦伟、杨勇。 1 范围 本标准规定了除草剂啶磺草胺水分散粒剂的液相色谱测定方法。本标准适用于除草剂啶磺草胺水分散粒剂中有效成分含量的检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6379.2 测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 方法提要 试样经乙腈-水体系溶解并稀释，滤膜过滤后，用反相高效液相色谱法测定，外标法定量。 4 试剂和材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂，实验所用水应符合 GB/T 6682 中一级水要求。 4.1 乙腈：色谱纯。 4.2 磷酸：纯度 85.0% 以上。 4.3 溶剂：乙腈：水 = 3:1（体积比）。0.1% 磷酸溶液：量取 1mL 磷酸（4.2），加入 1L 水中，过滤并脱气。 4.4 啶磺草胺标样：纯度 ≥95%（pyroxsulam，CAS：422556-08-9）。 4.5 有机相滤膜：0.45μm。 4.6 标样储备液：平行称取啶磺草胺标准品（4.4）约 0.2g（精确至 0.0001g），置于 50mL 容量瓶中，用乙腈（4.1）溶解样品，并稀释至刻度，在超声波水浴中超声约 5min 后摇匀。该标样储备液置于 0℃～5℃ 冰箱内备用，有效期半年。 4.7 标样工作溶液：准确吸取 5.0mL 标样储备液（4.6），转移至 50mL 容量瓶中，然后用乙腈（4.1）作稀释剂，稀释至刻度。 5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪：具有紫外检测器。 5.2 超声仪：功率 ≥200W。 5.3 容量瓶：50mL。 5.4 分析天平：感量 0.01mg 或 0.1mg。 6 测定步骤 6.1 样品处理 平行称取相当于原药约 0.2g 的试样（精确至 0.0001g），置于 50mL 容量瓶中，用溶剂（4.3）溶解样品，并稀释至刻度，在超声波水浴中超声 5min 后摇匀。准确移取 5.0mL 该溶液，转移至 50mL 容量瓶中，然后用溶剂（4.3）作稀释剂，稀释至刻度。用 0.45μm 滤膜（4.5）过滤后供液相色谱测定。 6.2 液相色谱参考条件 液相色谱条件为： a) 色谱柱：C18，250mm × 4.6mm (ID) 不锈钢柱，5μm； b) 流动相：乙腈：0.1% 磷酸溶液（4.3）= 65:35（体积比）； c) 流速：0.7mL/min； d) 检测波长：280nm； e) 柱温：25.0℃； f) 进样量：5.0μL。 6.3 测定 在上述操作条件下，用流动相平衡 2h，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针峰面积响应值的重复性，待相邻两针的峰面积响应值变化小于 1.0%，按样品和标样穿插进样的顺序进行液相色谱分析，以外标法定量。典型的液相色谱图参见附录 A。 7 结果计算和表述 用色谱数据处理器或按公式 (1) 计算试样中啶磺草胺的含量，以质量分数表示： X = (A_x * m_s * P) / (A_s * m_x) * 100% 式中： X 为试样中啶磺草胺的含量，% A_x 为试样溶液中啶磺草胺峰面积； m_s 为啶磺草胺标样的质量，单位为克 (g)； P 为啶磺草胺标准品的含量，% A_s 为标样溶液中啶磺草胺峰面积； m_x 为试样的质量，单位为克 (g)。 计算结果以两次平行试验结果算术平均值表示，保留 3 位有效数字。 8 允许差 相对标准偏差应不大于 1.5%。 9 精密度 (1) 由 9 个实验室对水平在 7.5% 的试样进行方法精密度试验，按照 GB/T 6379.2 进行统计，结果见表 1。 表 1 方法精密度 重复性 S_r: 0.0260 重复性限 r_95: 0.0728 再现性 S_R: [数据未提供]